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恒温恒湿培养箱在实验室使用

阅读:435        发布时间:2020-10-08
对于 恒温恒湿培养箱对所需实验室设备的种类和使用也有一定的标准和规范:细胞培养的主要重点是保持无菌操作,避免微生物和其他有害因素的影响。显微镜:倒置显微镜是细胞培养实验室的常规必备设备。主要用于了解细胞生长情况,观察是否有污染。资金允许的情况下,建议选用高质量的相差显微镜、解剖显微镜、荧光显微镜、视频记录系统或配备摄像系统的延时胶片拍摄设备,以便随时拍摄和记录细胞生长情况。
超净工作台:目前大多数细胞实验室采用超净工作台实现无菌操作,具有操作简单、安装方便、占地面积小、净化效果好等优点。超净工作台主要有两种类型——侧流式(立式)和外流式(卧式层流式)。其工作原理是室内空气先经粗滤器过滤,再由离心风机压入静压箱,再经高效空气过滤器过滤。洁净气流以一定的截面风速通过无菌区,形成无尘、无菌、高洁净的工作环境。
2。(1) 侧流工作台:空气净化后的气流通过工作台从左侧或右侧流向另一侧,部分气流自上而下或自下而上流向对侧,形成气流屏障,保持工作区无菌,工作台结构封闭;
(2)外流式工作台:净化空气流向操作人员,因此外来气流不会混入操作。工作台的结构是开放的,但不利于操作者进行有害物质的实验。超净工作台的清洁度应由相关部门定期检查。超净度达到工作台清洁度100级。粉尘粒子计数器检测到的粒径≤5μm的粉尘颗粒数不应超过3.5个/L;空气流量应控制0.75-1.0m3/s;平均菌落数lt;1;必要时应根据无菌情况更换过滤器。
3。 恒温恒湿培养箱体外和体内培养的细胞需要恒定的温度下存活。一般情况下,适宜生长温度为37℃,温差不应超过±0.5℃。当温度升高2℃时,当温度超过40℃时,细胞迅速死亡。因此选择恒温箱和恒温箱。
(1)恒温培养箱:选用防水型或晶体管型自动恒温培养箱,灵敏度高,控温稳定。一般恒温培养箱价格便宜,但只适合封闭培养。
(2)CO2培养箱:目前,大多数细胞培养室已得到广泛应用。二氧化碳培养箱的优点是能为细胞培养提供一定量的二氧化碳(常用浓度为5%),易于稳定培养基的pH值,适合于开放式或半开放式培养。使用培养瓶时,为了使培养瓶内部与外界保持通风,瓶盖可以稍微松开。为了避免细胞污染,培养箱中的空气必须保持清洁,并定期用紫外线或酒精消毒。同时,培养箱中应放置装有无菌蒸馏水的水箱,以防止培养基蒸发,保持箱内相对湿度为100%。
(3)细胞培养耗材:可使用盘子、盘子或瓶子进行细胞培养。对于这部分知识,雷蓓没有详细介绍。这部分知识将主要实验室耗材的知识部分介绍。
4。烘箱(烘箱):一些用于细胞培养的仪器和器具使用前必须干燥,玻璃器皿必须经过干热消毒。干热消毒时,烘箱内温度应达到160℃以上,一般采用鼓风炉。该方法的优点是温度均匀,效果好,但加热过程缓慢。加热时,不允许先加热后鼓风,应同时吹风和加热,温度达到100℃时停止吹风。应注意避免纸或棉包装用具灼伤,这可能会影响细胞生长。消毒后不要立即开门,以免突然冷却造成玻璃器皿破损。温度降到100℃以下,门才能打开。
5。净水装置:细胞培养用水水质高,细胞培养制备用水、细胞培养液、细胞培养器具清洗用水必须事先严格净化。目前有多种净化方法相结合,可以将普通水净化为纯水和超纯水。该装置可壁挂式、台式,配有储水罐,也可直接与液体分离枪配套使用。还可根据各种实验用水的要求选择和配置杀菌功能,有效去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等,有效去除热源和内毒素过滤式纯水装置。冰箱:细胞培养实验室的必备设备,应专用,不应存放易挥发和易燃的有害细胞物质,并应保持清洁。一般包括普通冰箱、低温冰箱和超低温冰箱。(1) 普通冰箱:可储存培养基、生理盐水、汉克斯溶液试剂等培养物,可短时间保存组织样本。(2) -20℃低温冰箱和超低温冰箱:用于储存需要冷冻以保持生物活性和长期储存的制剂,如酶、血清等。细胞冷冻:储存装置中常用的液氮容器,根据使用需要可分为不同的型号和规格。选择液氮容器应考虑三个因素:容积大小、取放方便、液氮挥发量。液氮容器尺寸一般为25-500l,可储存约250-15000支1ml安瓿,当液氮温度较低时,温迪可达到-196℃。使用时要注意避免冻伤。由于液氮的挥发性,必须观察残留液氮量,及时补充,避免液氮不足造成细胞损伤或死亡。目前,有许多智能细胞冷冻储存装置可供选择。可配置带电子控制器的液氮储存装置,实现自动冷冻储存;可监控液氮液位和样品温度,确保样品温度始终处于设定温度点;可配置报警系统,设置液氮液位、温度、电池、电压,电源等异常情况报警,同时有热气旁路系统防止-130℃以上的暖空气进入液氮罐,更有效地保护样品,防止容器内温度升高。另外,可选择液氮供给罐,通过连接管向储罐补充液氮,保证样品安全。
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